真菌毒素(mycotoxins) 是由真菌在食品或饲料里生长产生的代谢产物,对人类和动物都有害。真菌和真菌毒素的广泛存在,严重影响农作物的产量,降低农产品和饲料品质,造成巨大经济损失。据悉,全世界每年由于霉变污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿美元。我国谷物霉变主要发生在北纬31°线即长江以南地区,每年使粮食减产3~7%。据调查,除粮食、饲料以外,在油料作物、种子、水果、干果、蔬菜、调味品、烟草、麻类、乳和乳制品、鱼虾、肉类、发酵产品等都发现了不同程度的真菌毒素污染。真菌毒素一般都是相对分子质量小的物质, 通常不被粮食谷物加工工艺或食品的烹调加热所破坏;所以在某种程度上比其他毒素如细菌毒素更危险。
粮食及饲料中真菌毒素的检测方法可以分为三类:
一、 生物学检测法:利用真菌毒素能影响微生物、水生动物、家禽等生物的细胞代谢来鉴定真菌毒素的存在,其方法专一性差,灵敏度低,已经很少使用。
二、 理化检测法:通常是薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)。TLC虽然简便,但灵敏度差;HPLC虽然灵敏度高,但样品处理烦琐,操作复杂,仪器昂贵,标准品耗用大。
三、 免疫化学检测法:通过免疫学建立起来的分析技术,如ELISA方法和胶体金免疫层析方法。ELISA法特别适宜大批样品集中检测,胶体金免疫层析方法适合现场单个或少数样品即时检测。
ELISA法和胶体金法基于抗原抗体的免疫原理,在真菌毒素的现场检测时具有以下优势:
1) 单个样品即可检测,检测成本低,适用范围广;
2) 灵敏度高:胶体金法可检出量可达ng级。ELISA法最低检出量可达pg级,并可定量测定。
3) 特异性强:抗体抗原的免疫反应特异性很强,结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小,可检测样本本身颜色深的产品,如玉米。
4) 操作简便,反应迅速:由于特异性强,简化了样品的预处理和提取纯化过程,同时操作步骤也非常简便,胶体金法5~10分钟即可判读结果,酶联法1小时内出结果。
胶体金及ELISA法优缺点对比 |
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方法名称 |
优点 |
局限性 |
适用单位 |
胶体金快速检测法 |
1、简便快速,5分钟出结果 |
1、定性检测,只判断超不超标,不给具体数据 |
a.饲料生产加工企业 |
2、样品处理时间非常短 |
2、检测样品范围较窄,不能测含油较多的样品 |
b.粮食谷物粗加工企业 |
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3、携带方便,适用基层 |
3、用于提取的溶剂为甲醇,有一定的毒性 |
c.工商质监部门用于快速筛查 |
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4、可以单个样品逐一检测,不需要做曲线 |
4、检测高灵敏度低于ELISA法 |
d.畜禽养殖户自查 |
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5、无需复杂设备和专业知识,操作人员5分钟即可学会,即学即用 |
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6、室温保存,保存期长 |
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酶联免疫(ELISA)法 |
1、准确定量,有明确数据。 |
1、操作相对复杂,需要专业人员操作 |
a.食品相关分析实验室 |
2、批量样品,一次检测 |
2、保存温度有限制,保存期一年 |
b.粮油监测检测中心 |
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3、采用直接竞争法,步骤简单 |
3、不适合基层现场检测 |
c.有条件的粮油饲料生产加工企业 |
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4、检测灵敏度达pg级,检测范围广 |
4、检测样品范围较窄,对于含油较多的样品,需另行设计样本处理方法 |
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5、检测值基本不受样品底色干扰 |
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真菌毒素常快速检测产品介绍 |
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检测项目 |
快速检测方法 |
检测限和检测样品 |
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黄曲霉毒素B1快速检测产品 |
灵敏度: |
1ppb |
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检测样本: |
谷物/饲料 |
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灵敏度: |
0.02ppb |
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检测样本: |
谷物/饲料/食用油/啤酒/酱油 |
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玉米赤霉烯酮快速检测产品 |
灵敏度: |
10ppb |
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检测样本: |
谷物/饲料/粮油 |
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灵敏度: |
0.2ppb |
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检测样本: |
谷物、玉米、饲料等 |
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呕吐毒素快速检测产品 |
灵敏度: |
30ppb |
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检测样本: |
饲料、谷物 |
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灵敏度: |
3ppb |
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检测样本: |
谷物、玉米、饲料等 |
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伏马毒素B1检测产品 |
伏马毒素B1快速检测试剂盒 |
灵敏度: |
0.5ppb |
检测样本: |
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